Bio&SELL bietet Ihnen ein umfangreiches Portfolio an Leistungen für die QPCR an:

  • QPCR-Fertigmixe: preisgünstig und zuverlässig
  • Kundenspezifische gelabelte PCR Sonden (probes)
  • Seminare zu Real-Time-PCR
  • Auftragsarbeiten zu Real-Time-PCR
  • Real-Time-PCR Plastik: optimiert auf alle QPCR Anwendungen

 

Sie arbeiten bereits mit Fluoreszenzfarbstoffen wie SYBR Green® oder mit fluoreszenzmarkierten Sonden (labeled probes)?

Bio&SELL hat das passende Produkt für Sie!

Quantitative PCR mit EvaGreen® – die Alternative zur SYBR Green®- mit vielen Vorteilen!

  • Signalstärker als Syber-Green®
  • Konkurrenzlos hochauflösende DNA-Schmelzkurven
  • Kompatibel mit Multiplex-PCR
  • Nicht mutagen
  • Nicht cytotoxisch
  • Für alle QRT-PCR Geräte (Rox, No Rox, Capillary)
  • Geringere PCR-Inhibierung

Quantitative PCR mit gelabelten Sonden - maximale Spezifität!

  • Qualitätsstufe medizinische Diagnostik
  • Kundenspezifische Sonden
  • Besondere (floureszenzstärken sichernde) Herstellung
  • Schnelle Produktion und Lieferung
  • Enorm hohe Fluoreszenzstärke!
  • Fragen zur Auswahl der passenden Reagenzien für Ihren Real-Time-Cycler beantworten wir gerne

 

Sie möchten die quantitative PCR in Ihrem Labor neu etablieren?

Verschaffen Sie sich hier einen ersten Überblick:

Die Methode der quantitative PCR (qPCR) oder Real-time-PCR, häufig auch kombiniert mit Reverser Transkription (RT) zu Real-time RT-PCR oder quantitativer RT-PCR (qRT-PCR oder RT-qPCR), ist aus modernen Forschungs- und Analytik-Laboren nicht mehr wegzudenken.

Die Real-time-PCR oder quantitative PCR (qPCR)  ermöglicht die Bestimmung der Kopienzahl der untersuchten template DNA in einer Probe. Zur Quantifizierung einer spezifischen mRNA wird die Real-time-PCR häufig mit der Reversen Transkription (RT) kombiniert (Real-Time RT-PCR oder qRT-PCR). Hier wird die mRNA durch das Enzym Reverse Transkriptase in cDNA umgeschrieben, welche dann als template DNA für die folgende real time PCR eingesetzt wird.

Bei der Durchführung einer quantitativen PCR (qPCR) wird der Zuwachs an Produkt direkt in Echtzeit (engl. Real time) während der Reaktion gemessen. Dabei wird die Zunahme eines Fluoreszenzsignals detektiert, welches in der exponentiellen Phase der PCR direkt proportional zur Menge an gebildeten PCR-Produkt ansteigt.

Hierbei gibt es grundsätzlich zwei Möglichkeiten.

  • die Durchführung von Real-time-PCR Experimenten mit Fluoreszenzfarbstoffen wie EvaGreen®
  • die Sonden-basierte Real-time-PCR

 

Real-Time-PCR mit Bio&SELL EvaGreen® QPCR-Mix

Fluoreszenzfarbstoffe wie EvaGreen® oder  SYBR®-Green binden an doppelsträngige DNA und ermöglichen die Messung der Zunahme an PCR Produkt in Echtzeit während der Reaktion. Die Spezifität wird durch die Auswahl der Primer gewährleistet, da EvaGreen® an sämtliche vorhandene doppelsträngige DNA bindet.

Bio&SELL 5x QPCR Mixe EvaGreen® (Rox, No Rox oder Capillary) sind für EvaGreen®-basierte  Real-Time-Anwendungen optimiert und enthalten alle notwendigen Komponenten für eine quantitative PCR außer Template-DNA und Primer.

EvaGreen® ist ein DNA-bindender Farbstoff mit vielen Eigenschaften, die gegenüber der Verwendung mit SYBR® Green für die quantitative PCR viele Vorteile aufzeigen. Neben einem ähnlichen Spektrum gibt es drei wichtige Vorteile, die EvaGreen® gegenüber SYBR® Green hervorheben lassen: EvaGreen® weist eine niedrigere PCR-Inhibition auf, ist ein extrem stabiler Farbstoff und weder mutagen noch zytotoxisch. EvaGreen® ist kompatibel mit allen gebräuchlichen Real-Time PCR-Cyclern – wählen Sie einfach die Standardeinstellung für SYBR® Green oder FAM aus!

 

Real-Time-PCR mit Bio&SELL QPCR-Mix für die Sonden-basierte QPCR (Labeled Probes)

Der selektive Nachweis der amplifizierten zu untersuchenden Zielsequenz erfolgt durch den Einsatz spezifischer Sonden, die mit verschiedenen Fluorochromen gekoppelt sind (im allgemeinen Gebrauch auch „molecular beacons“ genannt). Gängige Sonden sind z.B. Fam-Tamra Sonden. Vorteil der Sonden-basierten Real-time-PCR ist der sequenzspezifische Nachweis entstehender doppelsträngiger DNA. Eventuell entstehende unspezifische Nebenprodukte werden nicht detektiert und können die Messung nicht beeinflussen.

Mit den QRT-PCR Mixen Bio&SELL 5x QPCR-Mix (Rox, No Rox oder Capillary) für Sonden-basierte Real-Time-Anwendungen bieten wir Ihnen „ready-to-use“ Master-Mixe an, mit allen notwendigen Komponenten für eine quantitative PCR bis auf Ihre Template-DNA und Ihre Primer. 
Die Mixe enthalten optimierte Komponenten sowie Bio&SELL Hot-Start Taq-DNA-Polymerase in einem proprietären Puffersystem, das auch die Detektion von “Low-Copy-Number-Targets” erlaubt.
Bei Bio&SELL können Sie auch Ihre selbst entworfenen Fluoreszens-markierte Sonden (labeled probes) in höchster Qualität beziehen. Wir bieten eine große Auswahl an möglichen 5'- und 3'– Modifikationen mit hohen Syntheseausbeuten und kurzen Lieferzeiten. Auch spezielle Anfragen bearbeiten wir gern.