Das IZ-Medium von Bio&SELL ist ein optimiertes serumfreies Medium für die effektive Kultivierung und Vermehrung von humanen Immunzellen in vitro – "ready-to-use"!
"ready-to-use" heißt für Sie:
- Keine teure Supplementierung (mit Serum)
- Einsparen aufwendiger Serumtests
- Keine batch zu batch Variationen
- Deutlich geringeres Kontaminationsrisiko
- Zeitersparnis
- Verlässliche, absolut reproduzierbare Ergebnisse
Serum freies „ready-to-use“ Medium für die in vitro Kultivierung und Expansion von Lymphozyten aus Vollblut. Das Medium ist speziell auf die Vermehrung von T-Zellen, CIK Zellen (Zytokin-induzierte Killerzelle)-, LAK-Zellen (Lymphokin-aktivierte Killerzelle), NK-Zellen (natürliche Killerzellen) in Suspensionskulturen ohne die Zugabe von Serum (Kälber oder humanes Serum) optimiert. Grundlage für das IZ-Medium bildet das RPMI 1640 und das DMEM-F12 Medium, welche durch den Zusatz spezieller Salze, Spurenelemente, Albumin, Cholesterin, Lipiden und Vitaminen angereichert wurde.
| Produkt | Artikel Nr. | Menge |
|---|---|---|
| IZ-Medium | BS.34.1000IZ | 1000 ml |
Anwendungsgebiete:
- Die Proliferation von T-Zellen aus mononukleären Zellen des peripheren Blutes (PBMC)/ Vollblut nach Stimulation
- Proliferation von NK-, LAK- und CIK-Zellen nach Stimulation
- Langzeitkultivierung von immortalisierten T-Zellen
Besonderheiten:
Das IZ-Medium enthält bewusst keine Wachstumsfaktoren (wie z.B. rekombinante Zytokine) für die Zelldifferenzierung oder die Anreicherung von T-Zellen aus Vollblutproben. Diese können somit abgestimmt auf die individuellen Anforderungen zugegeben werden.
Bio&SELL kundenspezifisches Medium: Wir können für Sie jedes Medium herstellen, wenn Sie uns die entsprechende Formulierung zukommen lassen! z.B. ohne Phenolrot, niedrigere Glukosekonzentration etc...
Protokoll
Zellkultur von Immunzellen
Zellen des peripheren Blutes sind in der G0 Phase arretiert und müssen zwingend mit Mitogenen (pflanzliche Lektinen, z.B. Phytohemaggluthinin PHA; oder Antikörper wie zB anti-CD3 ) stimuliert werden um einige Zeit in der Zellkultur kultiviert werden zu können.
Tipps zur Stimulation von T-Zellen:
- T-Zelldichte von 1x105/ml
- Zugabe von PHA nach Herstellerangabe (1-5μg/ml)
- Inkubationszeit liegt zwischen 48-72 Std. (abhängig vom Typ und dem Ursprung der Lymphozyten und deren Verwendung)
- Zugabe von frischem IZ-Medium und die weitere Stimulierung der T-Zellen ist nötig um die Kultur fortzuführen
Bitte beachten Sie: Die Prolifertaionsrate von primären Lymphozyten aus Vollblut ist begrenzt
Tipps zur Stimulation / Kultivierung von CIK
CIK werden durch Zugabe von IFN-γ, mAb anti-CD3 (OKT3) und IL-2 zu isolierten PBMCs (peripheral blood mononuclear cells) angereichert. Nach 2-3 Wochen in vitro Kultur ist ihre Konzentration 1000-fach erhöht.
Anwendungshinweise:
Lagerung: bei 2 - 8°C im Dunklen
Haltbarkeit: 10 Monate ab Produktionsdatum
IZ-Medium welches mit Supplementen / Wachstumsfaktoren angereichert ist ebenfalls bei 2 - 8°C im Dunklen lagern und häufiges Auftauen und Einfrieren vermeiden, vor Licht schützen.
Nur für die Forschung!
Üblicherweise enthalten Zellkulturmedien den Farbstoff Phenolrot als pH-Indikator. Während der Kultivierung von Zellen verschiebt sich der pH-Wert des Mediums mit der Zeit in den sauren Bereich. Durch einen Farbumschlag von rot nach gelb zeigt der Indikator die zunehmende Ansäuerung des Mediums an. Verschiebt sich der pH-Wert in den basischen Bereich, ändert sich die Farbe von rot nach violett. Dieser Farbumschlag ermöglicht eine einfache optische Kontrolle des pH-Wertes des Mediums und somit der Wachstumsbedingungen der kultivierten Zellen.
In einigen Fällen ist die Präsenz von Phenolrot jedoch unerwünscht. Besonders in der Kultur von Primärzellen kann die Verwendung von Medien mit Phenolrot unter Umständen zur Bildung von Artefakten führen. Auch kann die Anwesenheit von Phenolrot die Durchführung von chromogenen Bioassays stören oder unmöglich machen.
Für alle Zellkulturanwendungen, die in Abwesenheit von Phenolrot durchgeführt werden sollen, bietet Bio&SELL daher Spezialmedien an, die kein Phenolrot enthalten.
Ohne Phenolrot sind aktuell erhältlich: DMEM/Ham's F-12 und Ham's F-12
Sollten Sie ein anderes Standard- oder Spezialmedium ohne Phenolrot benötigen kontaktieren Sie uns gerne unter Diese E-Mail-Adresse ist vor Spambots geschützt! Zur Anzeige muss JavaScript eingeschaltet sein! oder 09128/ 7 24 32 32.
Auch Ihre ganz spezielle eigene Rezeptur ist umsetzbar. Informieren Sie sich unter kundenspezifische Medien.
Das auf EMEM basierende Fibroblasten Medium von Bio&SELL wird für ein verbessertes Wachstum der Zellen mit weiteren bzw. größeren Mengen an Aminosäuren und Vitaminen versetzt und stellt ein optimiertes Wachstums- medium zur Anwendung in der Fibroblastenzellkultur dar. Vor Gebrauch ist es mit 10 % FCS zu supplementieren.
| Produkte | Artikelnummer | Menge |
|---|---|---|
| Fibroblasten Medium | BS34.0804FIB | 1 x 500ml |
Neuronalzellen Kulturmedium
Mit dem Neuro-BS Basal-Medium von Bio&SELL können Hippocampus-, Cortex- und viele weitere Zellen des zentralen Nervensystems kultiviert werden.
Das Neuro-BS Basal-Medium von Bio&SELL enspricht in der Zusammensetzung weitgehend Neurobasal™ Medien anderer Hersteller:
- Mit L-Glutamin
- Ohne Glutamat
- Mit 2.2 g/L NaHCO3
Es eignet sich zur kurzen als auch längeren Zellkultur von Neuronen, ohne dass ein „feeder layer“ aus Astrozyten nötig ist. Das Medium enthält dabei kein Glutamat. Dieses sollte bei der Initial-Kultur zugegeben werden.
Das Neuro-BS Basal-Medium ist vor Gebrauch mit Serum bzw. (bei serumfreier Kultur) mit Bio&SELL Supplementen zu supplementieren:.
- Neuro-BS Basal-Medium Supplement NBS-N2 100x conc.
| Medium | Artikelnummer | Menge | |
|---|---|---|---|
| Neuro-BS Basal-Medium | BS.34.0090NBM | 1 x 500ml | |
| Supplemente | |||
| Neuro-BS Basal-Medium Supplement NBS-27 50x |
BS.34.27.010.SUP | 10ml | |
| Neuro-BS Basal-Medium Supplement NBS-27 50x |
BS.34.27.100.SUP | 100ml | |
| Neuro-BS Basal-Medium Supplement NBS-N2 100x |
BS.34.N2.05SUP | 5ml | |
| Neuro-BS Basal-Medium Supplement NBS-N2 100x |
BS.34.N2.10SUP | 10ml | |
| Neuro-BS Basal-Medium Supplement NBS-N2 100x |
BS.34.N2.50SUP | 50ml | |
Das Bio&SELL Keratinozyten Medium ist ein gebrauchsfertiges Medium für die serumfreie Kultivierung von humanen Keratinozyten.
Das Basismedium ist MCDB-Medium.
| Produkte | Artikelnummer | Menge* |
|---|---|---|
| Keratinozyten Medium serumfrei mit Supplementen Nach Supplementierung gebrauchsfertiges Medium für humane Keratinozyten. Supplemente sind im Preis inbegriffen |
BS24.553.0500 | 1 x 500ml |
| Keratinozyten Basal - Medium serumfrei Nach Supplementierung gebrauchsfertiges Medium für humane Keratinozyten. Ohne Supplemente |
BS24.553801 | 1 x 500ml |
* Mindestabnahmemenge 20 x 500 ml. Sollten Sie geringere Mengen benötigen nehmen Sie Kontakt mit uns auf.
Anwendung
ist für serumfreie Kultivierung von humanen Keratinozyten. Mit Keratinozyten Medium serumfrei wird das häufige überschießende Wachstum von Fibroblasten suprimiert, was zu einem selektiv besseren Wachstum von humanen Keratinozyten führt. Dieses Medium muss vor Gebrauch supplemtiert werden. Die Supplemente:
- Hypophysenextrakt (BPE)
- Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF)
- Insulin
- Ethanolamin
- Hydrocortison
- Phosphoethanolamin
können mitgeliefert werden und Sie gehen dabei wie folgt vor:
- Supplemente bei Raumtemperatur auftauen.
- Supplemente zum Basalmedium hinzufügen (auf Sterilität achten).
- Keratinozyten trypsinieren, mit PBS waschen und restliches Trypsin mit Trypsin-Inhibitor (10 mg/ml) abstoppen.
- Nochmals einen Waschschritt (PBS) durchführen und anschließend Zellzahl bestimmen. Bei Subkultivierung Zelldichte auf 3000 bis 5000 Zellen/ml einstellen. (Initialkultur 1 - 5 x 106/Zellen/cm2). Keratinozyten mit supplementiertem Keratinozyten Medium serumfrei im Brutschrank inkubieren.
- Alternativ Kulturschalen vorher mit Anheftungsfaktoren (Collagen, Fibronectin oder natürlichen bzw. synthetischen Fragmenten dieser Faktoren) beschichten.