Bio&SELL 5x QPCR Mix EvaGreen® ROBUST für EvaGreen®-basierte QPCR ist für Real-Time-Anwendungen wie quantitative PCR optimiert und enthält alle notwendigen Komponenten für eine quantitative PCR außer Template-DNA und Primer.

 

Der 5x QPCR Mix EvaGreen® ROBUST ist hochspezifisch und liefert hoch reproduzierbare Ergebnisse bei

  • niedrigen Kopienzahlen
  • langen Templates
  • GC-reichen Templates

Anwendungsbereich:

  • Einzusetzen ist das Produkt vor allem bei immer wieder auftretenden Abweichungen mit relevanten Auswirkungen auf das Ergebnis
  • UNG Behandlung (dUTP/dTTP im dNTP-Mix)
  • Extension unspezifisch gebundener Primer und Primer-Dimer-Bildung

Geräte und Geräte-Einstellung

    • Kompatibel mit allen gängigen Platten-Real-Time-Cyclern, unabhängig vom Bedarf an Rox.
    • Für alle "Standard Cyling-Modus"-, "Standard"-  und "Fast"- Real-Time Cyclern.
    • EvaGreen® ist kompatibel mit allen gebräuchlichen Real-Time PCR-Cyclern – wählen Sie einfach die Standardeinstellung für SYBR® Green oder FAM aus!
ProduktArtikelnummerGrößePreis in EURO
5x QPCR Mix EvaGreen® ROBUST BS76.550.0200 200µl = 50 Reaktionen im 20 µl Ansatz 39,00 €
BS76.550.1000 1.000µl = 250 Reaktionen im 20 µl Ansatz 174,00 €
BS76.550.5000 5.000µl = 1.250 Reaktionen im 20 µl Ansatz 779,00 €

Anwendung

  • Detektion and Quantifizierung von DNA und cDNA-Targets
  • "High resolution melt" Analysen
  • Profilerstellung von Genexpressionen
  • Mikrobielle Detektion
  • Bestimmung von viralen Belastungen
  • Für UNG-Behandlung sehr gut geeignet

Protokolle

  pdfDatenblatt

Empfohlenens Pipettier-Protokoll 

KomponenteVolumenEndkonzentration
Bio&SELL 5x QPCR Mix ROBUST 4 µl 1 x
Primer 1 (10 pmol/ μl) 0,2-0,4 µl 100 - 200 nM
Primer 2 (10 pmol/ μl) 0,2-0,4 μl 100 - 200 nM
Template-DNA 1-5 µl 0,002 – 2 ng/μl
Wasser auf 20 µl auffüllen  

Empfohlenens QPCR-Protokoll: Initialer Inkubationsschritt 12 min bei 95°C

KomponenteTemperaturZeiAnzahl Zyklen
Initiale Inkubation        95°C 12 min 1 x
Denaturierung 95°C 12-15 sec. 40 x
Annealing 59 - 65°C *19-30 sec.
Elongation 72°C *19-30 sec.
* 19 sek ausreichend für 150bp templates

 

*EvaGreen® ist ein DNA-bindender Farbstoff mit vielen Eigenschaften, die gegenüber der Verwendung mit SYBR® Green I für die quantitative PCR viele Vorteile aufzeigen. Neben einem ähnlichen Spektrum gibt es drei wichtige Vorteile, die EvaGreen® gegenüber SYBR® Green I hervorheben lassen: EvaGreen® weist eine niedrigere PCR-Inhibition auf, ist ein extrem stabiler Farbstoff und weder mutagen noch zytotoxisch. EvaGreen® ist kompatibel mit allen gebräuchlichen Real-Time PCR-Cyclern – wählen Sie einfach die Standardeinstellung für SYBR® Green oder FAM aus!

Mit internem Referenzfarbstoff Rox. Rox ist ein passiver, interner Referenzfarbstoff, der zur Normalisierung des Fluoreszenz-Reportersignals während der QPCR verwendet wird.
Die Endkonzentration des Rox-Farbstoffes im Reaktionsansatz beträgt 500 nM.

*EvaGreen® ist eine eingetragene Marke und lizenziert für den Verkauf durch die BIOTIUM, Inc., Hayward, CA, USA.

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SYBR® ist eine eingetragene Marke der Molecular Probes, Inc.