Mixe zur schnellen Herstellung von cDNA mit anschließender PCR: SCRIPTUM Kits

Die Vorteile der Kits:

  1. Schnell - Reverse Transkription und PCR in einem tube
  2. Bequem - 2 Reaktionen in einem Mix
  3. Hohe cDNA Ausbeuten auch bei langen und/oder komplex strukturierten cDNAs
  4. Hohe Spezifität - durch erhöhte Thermostabilität der Reversen Transkriptase
  5. Geringe Kontaminationswahrscheinlichkeit

Auch für die Detektion viraler RNA geeignet; zB.Coronavirus COVID-19 (SARS-CoV-2).

z.B. mittels Protokoll von Prof. Christian Drosten et al.: Diagnostic detection of 2019-nCoV by real-time RT-PCR (Charité, Virologie). Hier empfehlen wir unsere One Step RT-PCR Kits (zB.SCRIPTUM High Precise).

 

Die SCRIPTUM Mixe bestehen jeweils aus einer Reversen Transkriptase und einer Taq-DNA-Polymerase.

Beide Enzyme sind gentechnisch so optimiert, daß

  • sehr große Spezifitäten erreicht werden
  • eine hohe cDNA Ausbeute gewährleistet ist
  • und die Transkriptionseffizienz auch bei ausgeprägten Sekundärstrukturen optimal gewährleistet ist 

Zielsequenzen können generell in 1pg bis 20 ng poly(A) RNA (mRNA) oder 10/50 pg to 1µg Gesamt-RNA nachgewiesen werden. Hoch exprimierte Zielsequenzen können eventuell bereits aus geringeren RNA-Mengen erfolgreich amplifiziert werden.

Der SCRIPTUM High Precise Kit enthält eine Taq-DNA-Polymerase mit Proof-Reading-Aktivität. Der SCRIPTUM Standard Mix enthält eine „normale“ Taq-DNA-Ploymerase.

Nach der Zusammengabe aller Reaktionsbestandteile laufen die Reaktionen „Reverse Transkription“ und „PCR“ in einem Gefäß ab. (Vorgang siehe Datenblatt).

Dies sorgt für eine ungemein geringe Kontaminationswahrscheinlichkeit und für eine enorme Arbeitserleichterung, vor allem dann, wenn die gleiche Zielsequenz in vielen unterschiedlichen RNA Proben untersucht wird.

Die SCRIPTUM Mixe werden geliefert als:

  • Enzym-Mix Reverse Transkriptase + Hotstart-Taq-DNA-Polymerase und RNase Inhibitor in 50% Glycerol Puffer
  • Reaktionsmix mit 2-fach konzentriertem Puffer und dNTPs
  • RNAse-freies Wasser

 

Bildgrundlage: © Gernot Krautberger - Fotolia.com