Der UNG Virus RNA Detection Kit ist validiert für die molekulare Diagnostik von SARS-CoV-2 welches die neue Coronavirus-Infektionskrankheit COVID-19 verursacht.
Er ermöglicht quantitative Real-Time-Analysen (QPCR) von RNA -Templates mit doppelt markierten fluoreszierenden Sonden.
| Produkt | Artikelnummer | Menge |
|---|---|---|
| UNG Virus RNA Detection Kit | ||
| BS.01.1250UNG | 2 x 1,25 ml | |
| BS.01.6250UNG | 10 x 1,25 ml |
Protokolle
UNG Virus RNA Detection Kit (One Tube RT-QPCR Mix)
Kombination von 3 Schritten:
Der Bio&SELL UNG Virus RNA Detection Kit kombiniert dabei eine UNG Behandlung, die Reverse Transkription und die anschließende Real Time PCR in einem Tube. Die Kombination der Schritte direkt hintereinander reduziert die benötigten Pipettierschrittte auf ein Minimum. Das spart Zeit und reduziert gleichzeitig das Kontaminationsrisiko. Alle benötigten Reagenzien für die Synthese qualitativ hochwertiger cDNA und die quantitative Real Time PCR sind enthalten (außer Template, Primer und Sonde).
1. UNG Behandlung:
Um Kontaminationen mit anderen Proben auszuschließen enthält der Kit zum einen UNG (Uracil-N-Glycosylase), diese baut ganz zu Beginn der Reversen Transkription alle Uracilreste aus dU-haltiger DNA ab und wird dann selbst durch Hitze inaktiv. Zum anderen enthält der Kit selbst statt dTTP dUTP die so amplifizierte DNA kann so ebenfalls durch UNG in anderen Reaktionen wieder abgebaut werden womit Kreuz-Kontamination ausgeschlossen sind.
2. Reverse Transkription:
Der ready-to-use Enzym-Mix enthält eine gentechnisch optimierte Reverse Transkriptase mit verbesserter thermischer Stabilität. Dadurch wird eine höhere Spezifität, größere cDNA Ausbeuten und eine verbesserte Transkriptionseffizienz auch bei längeren cDNA Stücken mit ausgeprägter Sekundärstrukturbildung erreicht.
3. Quantitative Real-Time-Analysen (QPCR) mit doppelt markierten fluoreszierenden Sonden:
Die Real-Time-PCR Technologie basierend auf doppelt markierten Sonden bietet ein hoch sensitives und spezifisches PCR System mit Multiplex-Fähigkeit. Es benötigt zwei Standard-PCR-Primer und die DNA-Sonde, die an einem inneren Teil des Amplikons hybridisiert. Die Sequenz der doppelt markierte DNA-Sonde sollte möglichst keine Sekundärstruktur und keine Primer-Dimer-Bildung aufweisen.
Der Enzym-Mix in Premiumqualität und der optimierte Reaktionspuffer mit ultrareinen dNTPs garantieren herausragende Amplifikationsergebnisse.
Zur Isolierung viraler RNA (auch SARS-CoV-2) durch Säulen-Extraktion empfehlen wir unseren Virus-RNA Isolation-Kit.