Primärzellen haben eine hohe biologische Relevanz und lösen daher Zelllinien in vielen Bereichen als Modellsystem ab. Allerdings können Fehler bei den Routine-tätigkeiten zu niedrigen Anheftungsraten oder zu verlangsamtem Wachstum führen und Zellstress kann die Ergebnisse von Experimenten beeinflussen. In diesem Kurs lernen Sie die kritischen Schritte kennen und diese zu optimieren. Außerdem werden die gängigsten Techniken zur Isolierung von primären Zellen aus humanem Gewebe vermittelt: Explantattechnik und enzymatische Isolationstechnik werden exemplarisch vorgestellt. Wir versorgen Sie mit weiteren Tipps und Tricks, wie und wann Sie eine Charakterisierung der Kulturen durchführen und wie Sie Kontaminationen mit Fremdzellen vermeiden bzw. identifizieren.
Im theoretischen Teil werden u.a. folgende Themen behandelt:
- Einführung in die Primärzellkultur
- Routinemethoden in der Primärzellkultur
- Bioethik, Beschaffung von Gewebe
- Isolation, Reinigung und Charakterisierung von primären Zellen
- Kontaminationen in der Zellkultur
Der Praxisteil umfasst:
- Auftauen und Subkultivieren von primären Zellen
- Enzymatische Isolation von primären Zellen
- Herstellung von Explantaten
- Aufreinigung von Zellen mittels beads-Technologie
- Morphologische Kontrolle
Zielgruppe
Technische und wissenschaftliche Mitarbeiter/-innen mit Grundkenntnissen in der Zellkultur und praktischer Erfahrung, die ihr Wissen im Bereich Primärzellkultur erweitern möchten.
DozentInnen
Dr. Nicole Kühl hat an der TU Karlsruhe und der Universität Bremen Biologie studiert. Sie promovierte 1999 als Zell- und Molekularbiologin über Zellzyklus und Hitzeschockproteine. Danach wechselte sie an das Akademische Krankenhaus Groningen, Niederlande. Dort spezialisierte sie sich auf therapieorientierte Multiple Sklerose-Forschung und begann mit primären Gliazellen zu arbeiten. Dies setzte sie an der Jacobs University Bremen fort, wo sie ab 2003 eine Arbeitsgruppe hatte und als Dozentin „Biochemistry and Cell Biology“ unterrichtete. Von 2008 bis 2011 war Dr. Nicole Kühl die Leiterin der PromoCell Academy und Dozentin für Zellkultur- und QM Kurse. Seit 2012 ist sie als selbstständige Dozentin und Beraterin im Bereich Zellkultur QM und GMP tätig und betreibt das Trainings-Portal www.InCelligence.de. Sie berät pharmazeutische Unternehmen und Hersteller von Inkubatoren, Zellzählgeräten und Verbrauchsmaterialien. Seit 2016 ist Dr. Kühl external Head of QA der ANOVA IRM GmbH. Dort hat sie eine Herstellerlaubnis nach §13 AMG sowie eine Erlaubnis nach § 20b, c AMG für 2 stammzell-basierte Arzneimittel (BMC und Sekretom aus mesenchymalen Stammzellen, RPDA 2018) erwirkt. Dr. Kühl war Mitglied im DIN Arbeitskreis Biorektoren für das Tissue Engineering.
Priv.-Doz. Dr. Rüdiger Arnold studierte Biologie in Gießen und arbeitete danach als Postdoktorand am Max-Planck-Institut für Physiologie und Klinische Forschung in Bad Nauheim. Im Anschluss wechselte er ins Deutsche Krebsforschungszentrum und habilitierte an der Medizinischen Fakultät der Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg im Fach Immunologie. Dort beschäftigte er sich mit der Aktivierung, Differenzierung und Apoptose in Leukozyten und bei Lymphomen. Von 2011 bis 2015 leitete er das Schülerforschungslabor des Heidelberger Life-Science Lab am Deutschen Krebsforschungszentrum. Gegenwärtig lehrt er an der Universität Heidelberg und ist als Dozent bei biowissenschaftlichen Weiterbildungsprogrammen tätig. Dr. Arnold hat mehrere Jahre Zellkultur, Zellanalyse und Mikroskopiekurse für die PromoCell Academy Heidelberg gegeben.