Der DNase I Säulenverdau Kit entfernt effizient DNA. Zur Anwendung kommt dieser Kit, wenn kontaminierende DNA während RNA Präparationen sicher eliminiert werden soll. Dabei findet der Verdau während der Aufreinigung direkt auf der Silika-Zentrifugationssäule statt. Durch darauffolgende Waschschritte wird die DNase I zuverlässig wieder von der Säule entfernt. Im Anschluss kann die RNA wie gewohnt gewonnen werden.
Die im Kit enthaltene DNase I ist eine Endonuklease, die einzel- und doppelsträngige DNA in mono- und oligo-Nukleotide zerteilt. Die RNA bleibt dabei intakt.

Anwendungen:

• Ergänzung zum RNA Mini Kit
• Für alle Nachfolgeanwendungen (z.B. cDNA Banken) bei denen die RNA sehr rein und ohne DNA Kontaminationen vorliegen muss
• Der DNase I Säulenverdau Kit ist auf die RNA Kits von Bio&SELL optimiert. Funktioniert jedoch auch mit Kits anderer Anbieter. Das jeweilige Protokoll zuvor überprüfen.

Mit nur 20 min mehr Zeitaufwand wird die DNA vollständig während der RNA-Isolierung entfernt. Dieser Schritt erfolgt nach der Lyse anstelle eines Waschschrittes.

Mit dem si/ miRNA-Kit von können micro RNAs (miRNAs, 20-25 Nukleotide) sowie siRNAs (small interfering RNAs) verschiedener Herkunft isoliert werden:

• Gram+ oder gram- Bakterien
• Gewebeproben oder Biopsien bis zu 20 mg
• Zellkulturen bis zu 5 x 10⁶ Zellen
• In Paraffin eingebettete Gewebe

Der Kit ist enorm schnell; die Präparationszeit liegt bei 15-30 min. Diese Zeiten werden erreicht, da kein DNase-Verdau notwendig ist.

Außerdem garantiert der Kit hervorragende RNA-Ausbeuten von 100 µg bei höchster Reinheit.

Eigenschaften:

• Für bis zu 20 mg Gewebe
• Kein DNase-Verdau notwendig
• Präparationsdauer nur 15 - 30 Minuten 
• Bindungskapazität ca. 100 µgRNA
• Ausbeute: abhängig von Art und Menge des Ausgangsmaterials 
• Ratio A260 / A280: 1,7 - 2,0

Produktbeschreibung

Unser Blut RNA Mini Kit ist ideal für die Isolierung von RNA aus frischem Vollblut oder EDTA- bzw. Citrat-stabilisierten Proben. Unser säulenbasierter Kit beinhält einen Lysepuffer, der für den effizienten Aufschluß von Blutproben optimiert ist und gleichzeitig RNasen inhibiert. Durch integriertes Wegfiltern der DNA gelingt eine Isolierung der RNA, ohne DNA-Verdau, in nur 45-60 min. Unser RNA Mini Kit besitzt eine hervorragende RNA-Bindungskapazität  von über 20 µg und erlaubt eine schnelle sowie effektive RNA-Isolierung in höchster Qualität (Ratio A₂₆₀ / A₂₈₀: 1,7 - 2,0). Ihre Proben können vor der Lyse auch ohne Bedenken für längere Zeit bei -20 ^oC gelagert werden.

Eigenschaften

Schnelle Isolation - In nur 45 - 60 min 
Einfache Handhabung - Säulenbasierte RNA-Isolierung 
Hohe Ausbeute - Bindungskapazität > 20 µg RNA (abhängig von Art/Menge des Probenmaterials)
Guter Durchsatz - Geeignet für 0,5 - 1 ml Vollblut
Hohe Reinheit - Ratio A260/A280: 1,7 - 2,0
Hohe Sicherheit - Ohne Verwendung giftiger Substanzen wie Phenol, DTT, beta-Mercaptoethanol

Gut zu wissen

Ursprünglich basierten RNA-Aufreinigungsverfahren auf einer Zwei-Phasen-Extraktion gefolgt von einer Alkoholausfällung der RNA (z.B. Phenol-Chloroform-Isoamylalkohol-Extraktion). Diese Methode verwendet Phenol und Chloroform, um die Zellen zu lysieren. Bei Extraktionen ist es wichtig, dass perfekte Verhältnis zwischen Probe und Extraktionsmittel zu finden. Wenn zu wenig Extraktionsmittel im Verhältnis zur Probe verwendet wird, verschieben sich Ionenstärke und pH-Wert, wodurch die Reinheit der isolierten RNA gesenkt wird. Vollblut besitzt eine höhere Pufferwirkung, weshalb mit herkömmlichen Methoden ebenfalls Verschiebungen des pH-Werts auftreten können und die Isolierung von qualitativ hochwertiger RNA mit hoher Ausbeute schwierig wird. Unser Blut RNA Mini Kit bietet eine schnelle, einfache und effektive Methode zur Isolierung von RNA aus Blut.

Unser Blut RNA Mini Kit beruht auf einer Säulen-basierten Adsorption der RNA ohne Verwendung giftiger Substanzen wie Phenol oder Chloroform. Nach der Lyse des Vollbluts wird genomische DNA durch integriertes Filtrieren entfernt. Ein zusätzlicher DNase-Verdau der DNA ist nicht nötig. Anschließend wird die RNA in einem zweiten Filtrationsschritt reversibel an eine Silika-Zentrifugationssäule gebunden. Durch Waschschritte können hier Kontaminationen entfernt werden. Die Total-RNA wird zuletzt durch RNase-freies Wasser eluiert und kann direkt für downstream-Applikationen, wie z.B. quantitative PCR, eingesetzt werden.

Artikelliste

Der Bio&SELL RNAse-Inhibitor inhibiert die Aktivität der RNAse A, RNAse B und RNAse C. Die Inhibition ist vollständig und erfolgt durch eine nicht-kovalente Bindung im Verhältnis 1:1.

Anwendung

Protokolle

RNase Inhibitor Datenblatt