SILAC RPMI 1640

SILAC RPMI 1640 wurde auf Basis des Roswell Park Memorial Institute (1640) Mediums für die Markierung von Aminosäuren formuliert. Es enthält kein L-Arginin oder L-Lysin und ist für Labeling-Experimente optimiert, bei denen stabile, nicht-radioaktive Aminosäureisotope zur massenspektrometrischen Analyse der Proteinexpression eingesetzt werden (SILAC = stable isotope labeling with amino acids in cell culture). Die veränderte Formulierung hat keine Auswirkungen auf Morphologie oder Wachstumsraten von RPMI 1640-kultivierten Zellen.

Bei der SILAC-Methode werden dem Zellkulturmedium schwere, nicht-radioaktive Aminosäureisotope (z.B. Arginin mit ¹³C- anstatt ¹²C-Atomen) zugesetzt. Während der Zellkultivierung werden die "schweren" Aminosäureisotope über normale Stoffwechselprozesse in neu synthetisierte Proteine eingebaut. Die markierten "schwereren" Zielproteine können quantifiziert werden und so der Erforschung des Proteoms oder der intrazellulären Signalwege dienen. Der Gehalt an "schweren" Zielproteinen wird massenspektrometrisch gemessen.

Die Genauigkeit der Quantifizierung und die einfache Interpretation der MS-Ergebnisse macht die SILAC-Methode zu einer leistungsstarken Alternative zur Analyse des komplexen Proteoms (Proteineigenschaften, Proteinexpression, Proteinquantifizierung, Proteinstabilität) und der intrazellulären Signaltransduktion.

FAQs

Kann ich meine Zellen von einem "Basis"-RPMI 1640 direkt in das SILAC-RPMI 1640 überführen?

Wenn die Zusammensetzung Ihres „Basis“-RPMI 1640 Mediums mit unserem SILAC RPMI 1640 identisch ist, können Sie Ihre Zellen einfach umstellen. Achten Sie dabei besonders auf den Gehalt an L-Glutamin oder Natriumpyruvat. Diese Inhaltsstoffe unterscheiden sich häufig in verschiedenen RPMI-Medien. Wenn Sie zu SILAC RPMI 1640 ausreichend L-Lysin- und L-Arginin-Isotope hinzufügen, hat der Wechsel keinen Einfluss auf die Morphologie oder Wachstumsraten Ihrer Zellen. Ein Anpassungsprozess ist nicht erforderlich.