Accutase Lösung

Accutase ist eine enzymhaltige Zellabtrennungslösung für adhärente Zellen und stellt eine schonende Alternative zur herkömmlichen Trypsin-Behandlung dar. Ihre einzigartige Formulierung aus proteolytischen und kollagenolytischen Enzymen ermöglicht eine sanfte und effektive Zellablösung von Standard-Zellkulturgefäßen und Adhäsions-beschichteten Plastikwaren. Im Vergleich zur Zellablösung mit Trypsin/EDTA besticht unsere Accutase durch ihre einfachere Handhabung (Eine Inaktivierung der Enzyme durch Inhibitoren oder Serum ist nicht erforderlich. Verdünnen Sie die Zellsuspension einfach, um die Ablösung zu stoppen) und höhere Zellviabilität durch reduzierte Schädigung der Zellen.

Unsere Accutase ist frei von Säugetier- oder Bakterienbestandteilen und zeigt gute Ablöseeffekte bei adhärenten menschlichen und tierischen Zellen sowie Insektenzellen. Sie kann für die routinemäßige Abtrennung von Zellen zur Zellpassagierung oder die Analyse von Zelloberflächenmarkern, Zellproliferation und Zellhaptotaxis verwendet werden sowie für die Durchflusszytometrie, Viruswachstumsassays, Transformationsassays durch onkogene Transfektion, Neuralleistenzellmigrationsassays, Tumorzellmigrationsassays, Produktionsskalierung (Bioreaktor).

Accutase ohne Phenolrot

Es gibt Hinweise auf eine hormonbeeinflussende Wirkung von Phenolrot. Deshalb bieten wir Ihnen auch eine Accutase-Lösung ohne Phenolrot an, die sich insbesondere für die Forschung an endokrinologischen Zellen oder der Untersuchung hormoneller Kreisläufe und deren Einfluss auf Stoffwechsel, Wachstum, Fortpflanzung eignet. Die Accutase behält ihre schonenden Eigenschaften zur Zellablösung.

Sie erhalten die Accutase ohne Phenolrot als 3x Stocklösung (33,3 ml) zusammen mit 500 ml PBS ohne Ca2+, Mg2+.
Verdünnen Sie die Accutase-Stocklösung vor Gebrauch bitte 3:1 (für eine 100 ml finale 1x-konzentrierte Lösung) mit PBS ohne Ca2+, Mg2+.

Hohe Zellviabilität - Sanfte und effektive Zellablösung
Einfache Handhabung - Keine Inaktivierung notwendig
Komposition - Mit EDTA, mit/ohne Phenolrot

Kultivierte Zellen müssen regelmäßig passagiert (gesplittet, subkultiviert) werden, damit sie nicht zu engen Zell-Zell-Kontakten ausgesetzt sind und durch Zellkontakthemmung ihre Zellteilungsrate verringern. Die Passagierrate ist dabei zelltypabhängig (Standardkultur-bedingungen: 37°C, 5% CO₂ bei einer Konfluenz von ca. 80%). Um adhärente Zellen passagieren oder für eine Analyse aufbereiten zu können, müssen sie zuerst von ihren Kulturgefäßen abgelöst werden.

Als gängigste Methode gilt die sogenannte Trypsinierung, eine Zellabtrennung mithilfe von Trypsin- oder Trypsin/EDTA-Lösungen. Trypsin zählt zu den Serinproteasen und spaltet Peptidbindungen an der C-terminalen Seite von basischen Aminosäuren wie Lysin und Arginin. Bei der Trypsinierung werden extrazelluläre Adhäsionsproteine, durch die sich die Zellen an der Oberfläche von Kulturgefäßen anhaften, gespalten. Je länger Trypsin jedoch auf die Zellen einwirken kann, desto mehr Proteine werden gespalten und wichtige zelluläre Proteine geschädigt. Deshalb muss die Trypsinierung abgestoppt werden.

Die speziell ausgewählten proteolytischen und kollagenolytischen Enzyme unserer Accutase-Lösung spalten spezifisch Peptidbindungen von extrazellulären Adhäsionsproteinen und zeigen ein sehr viel schonenderes Zellabtrennungsprofil als Trypsin. Eine Inaktivierung der Enzyme ist daher nicht notwendig, verdünnen Sie die Zellsuspension einfach, um die Ablösung zu stoppen.

Vergleich Accutase vs Tryspin

• Sanfteres Detachment: Accutase löst Zellen schonender, mit weniger Zellschäden und geringerer Verletzung der Zellmembran im Vergleich zu Trypsin.
• Höhere Viabilität: Durch den schonenderen Prozess bleibt ein größerer Anteil der Zellen vital und metabolisch funktionsfähig.
• Besserer Erhalt der Oberflächenmarker: Die Accutase-basierte Zellablösung schont Oberflächenproteine, was die spätere Immunophenotypisierung (z. B. FACS) und funktionelle Analysen erleichtert. Auch downstream Anwendungen wie Gen- oder Proteinstudien werden einfacher.
• Breitere Kompatibilität mit Zelltypen: Accutase ist besonders sinnvoll bei adherenten Zellen, die empfindlich gegenüber proteolytischer Aktivität sind. Viele Stamm- und Epithelzellen zeigen besseres Detachment mit Accutase.
• Weniger Aktivierung Stress-induzierter Signalwege: Die Accutase-basierte Zellablösung erzeugt geringeren zellulären Stress und minimiert die Aktivierung von Stresssignalwegen.
• Einfachere Handhabung: Accutase braucht kürzere Verdauungszeiten als Trypsin und benötigt keine Inaktivierung. Accutase ist daher praktisch und flexibel.