Unser Immunzell (IZ) Medium ist ein serumfreies, ready-to-use Zellkulturmedium für die in vitro-Kultivierung und Expansion humaner Immunzellen. Optimiert wurde das Medium speziell für das Wachstumvon T-Zellen, CIK Zellen (Zytokin-induzierte Killerzelle), LAK-Zellen (Lymphokin-aktivierte Killerzelle) und NK-Zellen (natürliche Killerzellen) in serumfreien Suspensionskulturen. Unser IZ Medium wurde auf Basis von RPMI 1640 und DMEM/F12 entwickelt und mit speziellen Salzen, Spurenelementen, Albuminen, Cholesterin, Lipiden und Vitaminen angereichert. Unser IZ Medium ist ready-to-use und benötigt keine weitere Supplementierung. Unser IZ-Medium enthält bewusst keine Wachstumsfaktoren (wie z.B. rekombinante Zytokine) für die Zelldifferenzierung oder die Anreicherung von T-Zellen aus Vollblutproben. Geben Sie diese abgestimmt auf die individuellen Anforderungen Ihrer Zellen hinzu.
Unser IZ Medium ermöglicht die Proliferation von T-Zellen aus mononukleären Zellen des peripheren Blutes (PBMCs)/Vollblut, Proliferation von NK-, LAK- und CIK-Zellen nach Stimulation und die Langzeitkultivierung von immortalisierten T-Zellen. Die serumfreie Kultivierung der Immunzellen erspart Ihnen aufwändige Serumtests, verhindert batch-to-batch Variationen und ermöglicht so maximale Reproduzierbarkeit. Außerdem verringert sich das Risiko möglicher Kontaminationen.
Zellen des peripheren Blutes sind in der G0 Phase arretiert und müssen zwingend mit Mitogenen (pflanzliche Lektinen, z.B. Phytohemaggluthinin PHA; oder Antikörper wie zB anti-CD3 ) stimuliert werden, um in vitro kultiviert werden zu können.
Tipps zur Stimulation von T-Zellen:
T-Zelldichte von 1x105/ ml
Zugabe von PHA nach Herstellerangabe (1-5 μg/ml)
Inkubationszeit liegt zwischen 48-72 Std. (abhängig vom Typ und dem Ursprung der Lymphozyten und deren Verwendung)
Zugabe von frischem IZ Medium und die weitere Stimulierung der T-Zellen ist nötig um die Kultur fortzuführen
Bitte beachten Sie: Die Prolifertaionsrate von primären Lymphozyten aus Vollblut ist begrenzt
Tipps zur Stimulation/Kultivierung von CIK-Zellen:
CIK werden durch Zugabe von IFN-γ, mAb anti-CD3 (OKT3) und IL-2 zu isolierten PBMCs (peripheral blood mononuclear cells) angereichert. Nach 2-3 Wochen in vitro-Kultur ist ihre Konzentration 1000-fach erhöht.
Anwendung
Proliferation von T-Zellen aus mononukleären Zellen des peripheren Blutes (PBMCs)
Langzeitkultivierung von immortalisierten T-Zellen