BioColl® (Lymphozyten)
Unsere BioColl® Trennlösung mit der Dichte 1.077 g/ml ist ideal für die Isolierung humaner Lymphozyten mittels Dichtegradientenzentrifugation. Die wässrige BioColl® Trennlösung enthält neutrale, hochvernetzte Polysucrose mit einem durchschnittlichen Molekulargewicht von 400,000 Da. Mit Hilfe dieses hydrophilen Polymers wird ein Dichtegradient erzeugt, der Zellen und Zellbestandteile im Zentrifugalfeld je nach Größe, Form und Dichte auftrennt. Die passende Dichte der BioColl® Trennlösung wird je nach Partikeltyp ausgewählt. Eine Dichte von 1.077 g/ml eignet sich hervorragend für die PBMC Isolierung, insbesondere für die Isolierung von humanen Lymphozyten.
Für optimale Werte hinsichtlich pH-Wert und Osmolalität sollte die BioColl® Trennlösung mit einer Säure (bevorzugt Amidotrizoesäure (ATS)) und Natronlauge angepasst werden.
Eigenschaften
Dichte: 1.077 g/ml
Zur Isolierung humaner Lymphozyten
Zentrifugationsmedium aus hochvernetzter Polysucrose
Gut zu wissen
Zellen (z.B. PBMCs) werden durch die sogenannte Dichtegradientenzentrifugation isoliert. Dieses physikalische Verfahren basiert auf einer Trennung der Makromoleküle anhand ihrer Sedimentationseigenschaften (Größe, Gewicht) in einem Dichtegradienten. Die Isolierung von Zellen oder subzellulären Partikeln ist oft der erste Schritt bei diagnostischen Untersuchungen, Genexpressionsstudien oder bei der Herstellung von Antikörpern.
*BioColl® ist eine eingetragene Marke der Firma Bio&SELL.
Häufige Fragen und Antworten
BioColl® ist ein wässriges Zentrifugationsmedium auf Basis neutraler, hochvernetzter Polysucrose. BioColl® ermöglicht die PBMC Isolierung mittels Dichtegradientenzentrifugation. Die jeweilige Dichte wird passend zum Zielzelltyp ausgewählt, damit Zellen und Zellbestandteile während der Zentrifugation getrennt werden können.
Zur PBMC Isolierung mit BioColl wird Blut mit einer physiologischen Kochsalzlösung verdünnt. Die BioColl® Trennlösung wird vorsichtig mit dem verdünnten Blut überschichtet und zentrifugiert. Während der Zentrifugation wandern die Blutzellen an bzw. in die BioColl®-Schicht und kommen mit der enthaltenen Polysucrose in Kontakt. Basophile, Neutrophile, Eosinophile und Erythrozyten wandern aufgrund ihrer höheren Dichte in die BioColl®-Schicht hinein. Rote Blutkörperchen (Erythrozyten) aggregieren in Anwesenheit von Polysucrose. Die Aggregation bewirkt eine Erhöhung der Sedimentationsrate der Erythrozyten, die sich zusammen mit den Granulozyten als Pellet am Boden des Zentrifugenröhrchens ansammeln. Lymphozyten, Monozyten und Thrombozyten dringen aufgrund ihrer geringeren Dichte nicht in die BioColl®-Schicht ein. Diese Zellen sind nach der Zentrifugation über der BioColl®-Schicht konzentriert und können durch vorsichtiges Pipettieren leicht geerntet werden.
Blutproben sollten so bald wie möglich nach ihrer Entnahme verarbeitet werden, um optimale Ergebnisse und eine optimale Lebensfähigkeit der Zellen zu erzielen. Das Lagern von Blutproben für mehr als 12 Stunden bei Raumtemperatur führt zu einer reduzierten
Ausbeute an Lymphozyten, einer Veränderung der Oberflächenmarker und einer gestörten Reaktion auf Mitogenstimulation. Für die Abtrennung von Lymphozyten verwenden Sie bitte defibriniertes oder mit Antikoagulantien (Heparin, EDTA, Citrat) behandeltes Blut.
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Thrombozyten |
Dichte 1.040 - 1.060 g/ml |
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Monozyten |
Dichte 1.059 - 1.068 g/ml |
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Lymphozyten |
Dichte 1.066 - 1.077 g/ml |
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Basophile |
Dichte 1.075 - 1.081 g/ml |
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Neutrophile |
Dichte 1.080 - 1.099 g/ml |
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Eosinophile |
Dichte 1.088 - 1.096 g/ml |
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Erythroztyen |
Dichte 1.090 - 1.110 g/ml |
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BioColl® Trennlösung |
Artikelnummer |
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Humane Lymphozyten |
Dichte 1.077 g/ml |
BS.L6115 |
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Humane Monozyten |
Dichte 1.068 g/ml + 1.077 g/ml |
BS.L6815 + BS.L6115 |
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Humane Granulozyten |
Dichte 1.077 + 1.1 g/ml |
BS.L6115 + BS.L6155 |
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Murine Lymphozyten |
Dichte 1.086 g/ml |
BS.L6121 |