BioColl® (Monozyten)
Unsere BioColl®-Trennlösung ist enthält neutrale, hochvernetzte Polysucrose mit einem durchschnittlichen Molekulargewicht von 400.000 Da. Mit diesem hydrophilen Polymer können wässrige Lösungen mit verschiedenen Dichten (bis etwa 1.2 g/ml) hergestellt werden, die zur Isolierung von Zellen oder subzellulären Partikeln eingesetzt werden. Die passende Dichte der BioColl®-Trennlösung wird je nach Partikeltyp ausgewählt. Eine Dichte von 1.068 g/ml eignet sich hervorragend für die Isolierung von Monozyten. Für optimale Werte hinsichtlich pH-Wert und Osmolalität sollte die BioColl®-Trennlösung mit einer Säure (bevorzugt Amidotrizoesäure (ATS)) und Natronlauge angepasst werden.
Eigenschaften
Dichte: 1.068 g/ml
Zur Isolierung humaner Monozyten
Zentrifugationsmedium aus hochvernetzter Polysucrose
Gut zu wissen
Um Monozyten spezifisch von anderen einkernigen Blutzellen (wie z.B. Lymphozyten) trennen zu können, ist ein doppelter Polysucrosegradient notwendig. Dazu wird BioColl® für Monozyten (BS.L6815) über BioColl® für Lymphozyten (BS.L6115) geschichtet. Lymphozyten und Thrombozyten passieren aufgrund ihrer höheren Dichte die BioColl®-Schicht für Monozyten (Dichte 1.068 g/ml), aber nicht die BioColl®-Schicht für Lymphozyten (Dichte 1.077 g/ml). Nach der Zentrifugation befinden sie sich zwischen den beiden BioColl®-Schichten. Monozyten dringen aufgrund ihrer geringeren Dichte nicht in die BioColl®-Schicht für Monozyten (Dichte 1.068 g/ml) ein. Nach der Zentrifugation befinden sie sich zwischen BioColl® für Monozyten (Dichte 1.068 g/ml) und der Plasmaschicht. Die Zellen können durch vorsichtiges Pipettieren leicht geerntet werden.
Wie funktioniert die Isolierung mittels BioColl®?
Zellen (z.B. PBMCs) werden durch die sogenannte Dichtegradientenzentrifugation isoliert. Dieses physikalische Verfahren basiert auf einer Trennung der Makromoleküle anhand ihrer Sedimentationseigenschaften (Größe, Gewicht) in einem Dichtegradienten. Die Isolierung von Zellen oder subzellulären Partikeln ist oft der erste Schritt bei diagnostischen Untersuchungen, Genexpressionsstudien oder bei der Herstellung von Antikörpern.
Welche Dichten haben meine Zellen/Zellpartikel?
| Thrombozyten | Dichte 1.040 - 1.060 g/ml |
| Monozyten | Dichte 1.059 - 1.068 g/ml |
| Lymphozyten | Dichte 1.066 - 1.077 g/ml |
| Basophile | Dichte 1.075 - 1.081 g/ml |
| Neutrophile | Dichte 1.080 - 1.099 g/ml |
| Eosinophile | Dichte 1.088 - 1.096 g/ml |
| Erythroztyen | Dichte 1.090 - 1.110 g/ml |
Welche BioColl® Trennlösung benötige ich für meine Zellen?
| BioColl® Trennlösung | Artikelnummer | |
| Humane Lymphozyten | Dichte 1.077 g/ml | BS.L6115 |
| Humane Monozyten | Dichte 1.068 g/ml + 1.077 g/ml | BS.L6815 + BS.L6115 |
| Humane Granulozyten | Dichte 1.077 + 1.1 g/ml | BS.L6115 + BS.L6155 |
| Murine Lymphozyten | Dichte 1.086 g/ml | BS.L6121 |
*BioColl® ist eine eingetragene Marke der Firma Bio&SELL.