RT-qPCR Kits für die direkte RNA-Analyse
Bei der Reverse Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) wird RNA enzymatisch in komplementäre DNA (cDNA) umgeschrieben und anschließend amplifiziert. Das Enzym, das die RNA in cDNA umschreibt nennt man Reverse Transkriptase. Mit Hilfe einer Polymerase wird die cDNA anschließend vervielfältigt. Bei der quantitativen RT-PCR (RT-qPCR) kann die DNA Amplifizierung mit Hilfe von DNA-interkalierenden Farbstoffen oder fluoreszierenden Sonden in Echtzeit detektiert werden. Das lässt quantitative Rückschlüsse zu. Bei der One-Step-RT-qPCR laufen Reverse Transkription und quantitative PCR im selben (in einem einzigen) Reaktionsgefäß ab. Das ist besonders praktisch, wenn Proben mit möglichst wenigen Arbeitsschritten analysiert werden sollen.
Für die Wahl des passenden RT-qPCR Mixes ist vor allem die Nachweismethode entscheidend: SYBR® Green wird für dye-basierte Assays eingesetzt, während bei der Sondenchemie eine markierte, sequenzspezifische Sonde das Fluoreszenzsignal liefert. Achten Sie außerdem darauf, dass der ROX-Referenzfarbstoff zu den Einstellungen und Anforderungen Ihres qPCR-Geräts passt. Finden Sie bei uns den passenden RT-qPCR Kit für Ihre Anwendung!
RT-qPCR Kits von Bio&SELL:
FAQs
Was ist ein One-Step RT-qPCR Kit?
Bei der One-Step RT-qPCR wird die Reverse Transkription, also die Umschreibung von RNA in cDNA, und die quantitative PCR in einem gemeinsamen Reaktionsansatz durchgeführt.
Wann wähle ich einen SYBR®-Green Mix?
Ein SYBR®-Green-Mix eignet sich für RT-qPCRs, bei denen die Fluoreszenz über einen DNA-bindenden Farbstoff erfasst wird. Bitte prüfen Sie vorher, ob diese Methode zu Ihrem Versuchsaufbau passt.
Wann ist ein Probe-Mix die passende Wahl?
Ein Probe-Mix ist für sondenbasierte Assays vorgesehen, bei denen eine sequenzspezifische Sonde zur Signalerfassung eingesetzt wird. Bitte prüfen Sie vorher, ob diese Methode zu Ihrem Versuchsaufbau passt.
Was bedeutet ROX bei einem RT-qPCR Mix?
ROX ist ein Referenzfarbstoff, der bei bestimmten qPCR-Systemen zur Signalnormalisierung verwendet wird. Prüfen Sie vor der Auswahl, ob Ihr Gerät ROX benötigt und welche Einstellung dafür vorgesehen ist.
